（1）培养基的分类
①按成分不同分类
天然培养基：指以天然物质为培养原料的培养基。常用的有马铃薯、豆芽汁、麦芽汁、玉米粉、麦麸、清糠、牛肉膏、蛋白胨、棉籽壳、木屑等。一合成培养基：用化学药物配制而成的培养基，一般见于研究性的培养基。如实验某种食用菌能利用哪种碳源，就选用各种有关的化学药材，分别制成各种培养基，观察实验菌种的生长情况。半合成培养基：以天然材料和化学药物混合配制而成的培养基。
②按菌种扩大形式分类
母种培养基：即常用的斜面培养基。广州等地介绍用枝条代替斜面培养基，这种枝条培养基也属母种培养基。原种培养基：即一般食用菌生产中的原种瓶子培养基。用于母种扩大培养。栽培种培养基：与原种培养基同。
③按物理性状分类液体培养基；固体培养基；半固体培养基。
（2）配制方法
①容器准备。食用菌生产中常用的容器为试管（制母种用），瓶子、塑料袋（制原种、栽培种用）。玻璃容器准备：玻璃容器最好先用肥皂粉泡水洗涤（使用过的试管最好煮沸处理）。若容器中附着有机物、油垢等，应先用去污粉擦洗。对旧的玻璃容器，特别是已染菌的容器，应先在漂白粉液中浸泡，然后用清水冲洗。一些早已洗净而过久堆放的瓶子，使用前，最好用1/1000-1/5000的高锰酸钾液处理。
棉塞的做法与要求，先扯一块够大的棉花，拿在左手中。然后，以右手顺序多次将棉花铺于左手中的第一、二、三……层棉花上。要求每次加入的棉花均比前一次小，且每层的棉花四周基本扯成圆形。已通过拇食两指圆圈的前端，成为表面光滑，且较坚硬的棉塞。然后，用左手将尚露在拇食两指圆圈表面的棉花转折成光滑且较坚硬的棉塞另一头。并将此头塞入试管或瓶内，塞紧即成为两头光滑无褶皱的棉塞。
棉塞应两头要光滑，特别是进入容器内的这一头，更应光滑无褶缝；棉塞的大小要与容器口的大小相吻合，不可太紧，亦不可太松；棉塞的2/3应塞入容器内，1/3留在容器口外。采用高压灭菌的应选用聚丙烯塑料袋，采用常压灭菌的可选用聚乙烯塑料袋。塑料袋的大小可根据生产的要求进行选择。现在有专业工厂可为各食用菌栽培单位提供不同规格的塑料袋。为节约开支，也可自制。
②配制方法
母种培养基：
配方为马铃薯（去皮）20%、葡萄糖2%、琼脂2%、水适量。制法是选不出芽、不烂的优质马铃薯，洗净去皮，按需要量称取（有芽的要将芽挖掉）。将称好的马铃薯切成薄片，放入铝锅中，按20克马铃薯加100毫升水的比例加入清水。加热煮沸，维持20分钟。用四层纱布过滤，取其汁液。称取琼脂，先在水中泡浸洗净后加入马铃薯的汁液中，继续加热溶化。加入规定量的葡萄糖，并用热水补足到规定水量。按各种菌种对pH的要求范围，将上述培养基用5%的稀盐酸或5%的氢氧化钠溶液调节。趁热迅速将上述培养基试管，装量约为试管长度的1/5。注意管口不要沾上培养基。
清洁试管口，塞上棉塞（棉塞松紧要适度，塞入试管的长度约为棉塞全长的2/3）。将塞好棉塞的试管直立，盖上牛皮纸，以粗线扎好。灭菌结束后取出，趁热将培养基放成斜面（即先在桌上放一木条，然后将试管一头搁在木条上，试管底靠桌子，使试管成一斜向。此时，可见管内培养基向上倾斜，应掌握整个培养基斜面长度不超过试管总长度的一半）。冷却凝固后即成斜面培养基，供母种接种用。有条件的，应对上述斜面进行无菌测定，检验灭菌是否彻底。方法是选取几支已灭菌的斜面，放入30℃左右恒温箱中培养3-5天。若未见斜面上长出杂菌，即可使用。
原种、栽培种培养基：一般食用菌的原种和栽培种培养基的配方及配制方法基本一致。其配方为杂木屑78%、糠20%、蔗糖1%、石膏1%、水适量。制法是选取无芳香味的、干燥无霉变的木屑，筛去木片、木条。取定量米糠先与定量石膏拌匀，然后加入木屑中充分拌匀。将蔗糖加入水中，溶解后加入木屑料中拌和，再加入适量清水。要求手紧握料时，指缝间有水而不下滴为度。装瓶（或装入塑料袋）时，以特制的扁弯铁钩压实木屑料，但不宜过紧，一般以瓶子倒悬而料不掉出为度（装料高度以达瓶肩为宜）。可将料已压实的瓶子口倾入清水中，转动瓶子，洗除瓶肩上沾住的木屑及外壁的木屑。待瓶口水迹稍千后，塞上棉塞，再包上牛皮纸或塑料薄膜（聚丙烯）。
目前，不少地区采用玉米粒为原料，制作原种和栽培种。实践证明，此法具有生长速度快，发菌旺盛的特点。较麦粒种制作更简便，成品率也较麦粒种高。从节约用粮角度出发，玉米属粗粮，故比以细粮小麦制种更为妥当。制法是将玉米粒以水浸泡24小时以上，冬季最好能放在较暖的环境下浸泡，夏天浸泡时间可适当缩短。捞起已浸泡好的玉米，放入锅内加水煮熟，要求煮到食之无生腥味、质软而韧为度。将煮熟后的玉米置于纱布上，吸去表面水分后立即装瓶，每瓶不宜装料过多，一般1公斤干玉米可装六瓶种（750克蘑菇瓶）。装好玉米的瓶口，塞上棉塞，并以牛皮纸包扎，于20磅压力下，灭菌1小时，或在常压条件下，煮沸后再保持6小时以上沸腾。然后，取出冷却到30℃左右，送入接种箱，行抢温接种。
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