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固体培养基应用最普遍的原料有作物的谷粒，秸秆、荚壳，树木的枝条、木屑、木片、以及畜粪等。这些原料中有的要经过堆制发酵，有的要经过粉碎处理，有的要加工成一定的形状后再利用。在纤维材料中，加入一定数量的玉米粉、马铃薯淀粉或糖类，有利于菌丝迅速定植、恢复生长，糖的用量一般不超过1%～1.5%；木材纤维含氮量低，在0.03%以下，为了补充氮素营养，要加入10%～25%的麦麸和米糠。作为培养菌种原料的米糠一定要新鲜，因为陈米糠含有过多游离脂肪酸，对菌丝生长不利。此外，还可以加入尿素、硫酸铵、硝酸铵的方法来补充氮素营养，加入量在0.1%左右。
在固体培养基中，根据需要还可加入1%～3%碳酸钙、1%～3%石膏粉、0.5%～1.0%过磷酸钙和1%骨粉。根据固体培养基的性质和形状，分为粪草菌种、棉壳菌种、木屑菌种、枝条菌种、木块菌种、谷粒菌种等。
配制固体培养基，除了注意主要原料的切断、粉碎、预湿吸水、充分软化外，还要注意主要原料与辅料之间的充分混匀。拌料用水宜采用无污染的河水、井水等自然水，或自来水，如有必要，也可使用1%石灰水的澄清液、淘米水，或10%的马铃薯煮汁。培养基的含水量依原料种类和物理性状、食用菌的生物学特性、制种要求而有所区别，一般为45%~65%，通常在55%~62%之间。
判断固体培养基的含水量是否合适，经验性的方法是用手紧握培养料，以指缝中有水外渗而不往下滴为适宜；如果没有水渍为过干，有水珠连续淌下为过湿，可用加水、加料、晾晒等方法加以调整。装瓶前对培养料可用pH试纸测一下酸碱度。培养料的酸碱度不合要求时，可用1%过磷酸钙澄清液、1%石灰水的上清液进行调整。
装瓶后，用捣木将培养料压实，并在料面上打接种孔，孔径1.2～1.5厘米，孔深直达瓶底。谷粒、木块或其它颗粒状培养基，装瓶后，在表面覆盖一层厚1.5～2.0厘米的木屑或棉壳培养料，既可防止水分蒸发，以有利于菌种定植。
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